احمد مجيد حمزة ايسر عايد احمد اسيل خالد عبد الستار
Adipose derived-mesenchymal stem cells have been used as an alternative to bone marrow cells in this study. Objective: We investigated the in vitro isolation, identification, and differentiation of stem cells into neuron cells, in order to produce neuron cells via cell culture, which would be useful in nerve injury treatment. Method: Mouse adipose mesenchymal stem cells were dissected from the abdominal subcutaneous region. Neural differentiation was induced using β-mercaptoethanol. This study included two different neural stage markers, i.e. nestin and neurofilament light-chain, to detect immature and mature neurons, respectively. Results: The immunocytochemistry results showed that the use of β-mercaptoethanol resulted in the successful production of neuron cells. This was attributable to the increase and significant overexpression of the nestin protein during the early exposure period, which resulted in the expression of the highest levels of nestin. In comparison, the expression level of neurofilament light-chain protein also increased with time but less than nestin. Non-treated mesenchymal stem cells, considered as control showed very low expression for both markers. Conclusion: The results of this study indicate that adipose mesenchymal cells represent a good, easily obtainable source of bone marrow cells used to developing the differentiation process.
الملخص باللغة العربية:
تم استخدام الخلايا الجذعية المشتقة من Adipose cells كبديل لخلايا نخاع العظام في هذه الدراسة. الهدف: تم عزل الخلايا في
المختبر, وتحديد هوية الخلايا الناتجة, وبعدها تحفيز تمايزها من خلايا جذعية الى خلايا عصبية من أجل إنتاج الخلايا العصبية والتي من شأنها
أن تكون مفيدة في علاج إصابات الأعصاب. طرائق العمل: تم عزل الخلايا الجذعية المزنكيمية من الخلايا تحت الجلد لجذع الفئران
المختبرية. بعدها تم تحفيز تمايز الخلايا الناتجة الى خلايا عصبية باستخدام مادة تحفيزية هي β-mercaptoethanol . ولغرض اثبات تمايز
الخلايا الناتجة تم استخدام نوعين من الماركرات لمرحلتين متتاليتين من مراحل انتاج الخلايا العصبية وهما nestin وهو ماركر موجود في
المراحل الاولية للانتاج ) أي الخلايا العصبية في المراحل الاولية للتمايز او غير الناضجة( و neurofilament light-chain وهو ماركر
موجود في المرحلة المتقدمة )أي الخلايا العصبية المكتملة التمايز او الناضجة(. النتائج: أظهرت نتائج الكيمياء المناعية ICC نجاح استخدام
مادة ال β-mercaptoethanol في إنتاج الخلايا العصبية. ويعزى ذلك إلى الزيادة التصاعدية والإفراط الكبير في التعبير عن بروتين nestin
خلال فترات التعرض المختلفة لمادة التمايز العصبي . وبالمقارنة كان مستوى التعبير عن بروتين neurofilament light-chain أقل خلال
فترات التعرض لمادة التمايز العصبي بالمقارنة مع الخلايا الجذعية المزنكيمية قبل التمايز والتي استخدمت للمقارنة والتي أظهرت مستويات
تعبير منخفضة جدا لكلا الماركرات. الاستنتاج: تشير نتائج هذه الدراسة إلى أن خلايا ال Adipose تمثل مصدراً جيداً لانتاج الخلايا العصبية
ويمكن الحصول عليها بسهولة مقارنة مع خلايا نخاع العظام المستخدمة عادة في الانتاج .